Количественный анализ гепатит с норма

Гепатит С. Количественный анализ. Норма, расшифровка результатов



Гепатит С. Чем он опасен для человека. Как диагностировать инфекцию. Что нужно для проведения анализа

Вирус гепатита С. Чем он опасен. Как вовремя его идентифицировать.

Оглавление:

Вирус гепатита С или ВГС – инфекционное заболевание, которое несет в себе молекулу рибонуклеиновой кислоты.

Этот тип вируса умеет легко приспосабливаться к условиям обитания и часто трансформируется в разные формы болезни, поэтому нашей защитной системе организма так сложно с ним справиться. Классифицируют шесть главных генетических типов инфекции и десятки подтипов. В наших краях зачастую встречаются первые три типа вируса.

По статистике лишь четверть случаев заболевания ВГС протекают без осложнений, во всех остальных случаях норма, если инфекция перерастает в хронический процесс, который пагубно влияет на внутренние органы. Так гепатит может осложняться печеночным фиброзом – процесс замены печеночных клеток. Дальше осложнения развиваются по цепной реакции: вследствие фиброза появляются раковые опухоли, болезнь печени перерастает в цирроз.

В большинстве случаев инфекция попадает в организм человека по кровеносным сосудам. Диагностируют вирус гепатита С несколькими методами. Отслеживают уровень концентрации антител к ВГС. Инфицирование не произошло, если в крови пациента не будут найдены антитела к ней. В противном случае вирус изучается более глубоко, проводят еще один тест — ПЦР. Только этот метод позволяет идентифицировать РНК вируса спустя всего полторы недели после заражения, во время, когда организм не успевает начать производство антител к инфекции, и последствия заражения никак не отражены на общем состоянии, тем более в результатах других исследований, таких как БАК и биопсия.



Анализ ПЦР на РНК: количественный и качественный. Расшифровка результатов

Вирусная нагрузка или количественный анализ ПЦР – анализ на определение уровня содержания инфекции в плазме. По сути, количественный анализ — это число молекул инфекционной рибонуклеиновой кислоты в одном миллилитре крови.

Р-ДНК – быстрый, дешевый и не самый точный количественный способ определения вируса на основе выявления клеток разветвленной ДНК. Этот тест может не идентифицировать заражение, присутствующее в организме из-за плохой чувствительности – около 450 МЕ/мл.

Количественный метод транскрипционной амплификации позволяет найти в организме клетки РНК. Этот способ появился сравнительно недавно, он стоит недорого и является достаточно эффективным средством диагностики. Чувствительность теста около 10 МЕ/мл.

Попробуем объяснить результаты анализов. Ниже приведена таблица и расшифровка.

Источник: http://testanaliz.ru/virus-gepatita-s-kolichestvennyy-analiz-rasshifrovka



Количественный анализ ПЦР на гепатит С

Существует множество субтипов HCV, из-за чего не всегда удается подобрать эффективные противовирусные лекарства и достичь желаемых результатов в лечении. Разнообразие возбудителей обусловлено их способностью изменять свою структуру, то есть мутировать. Вследствие этого иммунитет не успевает сформировать мощный ответ против патогенного агента, а медикаменты оказываются неэффективными.

Зачастую гепатит диагностируется на стадии цирроза, чему предрасполагает позднее выявление болезни из-за отсутствия клинических признаков. Только путем лабораторного исследования удается обнаружить HCV в инкубационном периоде.

Количественный анализ на гепатит С дает возможность не только установить факт присутствия возбудителя в крови, но и подсчитать его концентрацию.

Рекомендации по подготовке к анализу

Специфической подготовки к лабораторной диагностике не требуется. Достаточно придерживаться следующих рекомендаций:

  1. количественный анализ проводится натощак, при этом последний прием пищи – за 8 часов до забора крови;
  2. за двое суток следует отказаться от спиртного и «тяжелых» блюд;
  3. особое значение имеют лекарственные средства, которые принимает пациент. Они могут повлиять на результат исследования, поэтому врач должен знать о них.

Также не желательна тяжелая физическая нагрузка и физиотерапевтические процедуры накануне забора крови. Чтобы расшифровка количественного анализа на гепатит С получилась достоверной, не стоит пренебрегать вышеперечисленными рекомендациями.



Зачастую результат анализа пациент получает через сутки. Цена исследования на определение концентрации возбудителя в крови зависит от лаборатории и качества реактивов и может достигать 4 тысяч рублей.

Лабораторная диагностика гепатита С

К числу первостепенных методов диагностики относится ИФА, или иначе иммуноферментный анализ. Он назначается для обнаружения специфических антител к HCV. Его эффективность достигает 95%. Если расшифровка исследования дает положительный результат, стоит заподозрить присутствие возбудителя в крови.

Заметим, что у половины обследуемых при «+» тесте в ходе дальнейшей диагностики вирусный агент в крови не выявляется. ИФА в данном случае указывает на перенесенный контакт с HCV в прошлом, что подтверждается циркулирующими антителами.

Более точным исследованием является полимеразная цепная реакция, или иначе ПЦР. Она позволяет определить концентрацию РНК возбудителя в крови. Обнаружив генетический набор вируса в биологическом материале, врач подтверждает гепатит С.

ПЦР назначается пациенту для верификации диагноза. Она дает возможность выявить РНК на стадии, когда антитела еще отсутствуют. Существует несколько видов генетических исследований:


  1. количественный анализ ПЦР на гепатит С, который не только устанавливает факт присутствия возбудителя в крови, но и предоставляет информацию о его концентрации;
  2. качественный – подтверждает инфицирование;
  3. генотипирование – позволяет определить генотип патогенного агента и подобрать наиболее эффективные лекарства против него.

Полимеразная цепная реакция

Как уже было сказано, существует несколько видов лабораторного исследования:

  • качественный анализ – свидетельствует о присутствии патогенного агента в крови. Данный вид диагностики имеет определенный «уровень реагирования», поэтому не всегда оказывается достоверным. Чтобы правильно расшифровать результаты и получить реальные показатели, для исследования рекомендуется использовать тест-систему с чувствительностью — не ниже 50 МЕ/мл. Норма анализа – это «отрицательный ответ» или «вирус не обнаружен». Это указывает на отсутствие генетического набора возбудителя в исследуемом материале. Если результат оказался положительный, требуется дальнейшее обследование пациента;
  • количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет вирусную нагрузку, то есть концентрацию патогенного агента в крови. Результат исследования показывает число единиц РНК в фиксированном объеме биологической жидкости;

Вирусная нагрузка – это подсчет инфекционной РНК в одном миллилитре крови исследуемого. Единицы измерения – МЕ/мл, однако некоторые лаборатории определяют «копии/мл», при этом указывая на бланке нормы анализа для сравнения и оценки результатов.

  • генотипирование. Из-за способности возбудителя изменяться выбор эффективных противовирусных лекарств для терапии должен осуществляться на основании его генотипа. От него зависит не только результат, но и длительность лечебного курса. Так, гепатит HCV 1 требует назначения медикаментов на год, однако положительная динамика наблюдается лишь в 60% случаев. Что касается второго и третьего генотипов, то они являются менее стойкими к действию противовирусных средств, из-за чего эффективность терапии превышает 85%. При получении такого результата исследования – «вирус не типируется», стоит заподозрить присутствие возбудителя, который не распознается стандартными тест-системами.

Показания для анализа

Расшифровка количественного анализа на гепатит С необходима для:

  1. дальнейшего обследования пациента, когда при ИФА были обнаружены антитела к HCV;
  2. подтверждения диагноза;
  3. установления вирусной нагрузки при микст-инфекции, когда человек заражен несколькими видами возбудителя;
  4. определения тактики лечения (выбора противовирусных медикаментов, их замены или завершения терапии);
  5. оценки динамики прогрессирования заболевания, а также эффективности лекарств;
  6. определения стадии патологии (острая, хроническая).

ПЦР имеет следующие преимущества:

  1. хорошая чувствительность, благодаря чему удается подсчитать даже небольшое количество вируса;
  2. определение самого возбудителя (РНК), а не антигенов;
  3. специфичность методики — установление определенного типа патогенного агента;
  4. быстрота получения результатов, ведь для анализа не требуется выращивание культур на питательной среде. Ответ готов через 5 часов;
  5. универсальность – позволяет выявить генетический набор различных возбудителей, как РНК, так и ДНК-содержащих (гепатит В);
  6. обнаружение скрытой инфекции.

Лабораторное исследование помогает подтвердить диагноз и является неотъемлемой частью комплексного обследования (анализа клинических симптомов, результатов ИФА и биохимии).



Кроме того, ПЦР широко используется в аллергологии, генетике, а также для установления факта отцовства.

Расшифровка количественного анализа на вирус гепатита С

Оценка результатов лабораторной диагностики осуществляется врачом путем сравнения полученных данных с нормой.

Источник: http://propechenku.ru/gepatit/c/kolichestvennyj-analiz.html

Разновидности и необходимость применения исследований методом ПЦР

Вирус гепатита С — это вирус, который содержит молекулу РНК. Он способен избегать иммунного ответа организма благодаря высоким способностям к мутации. Различают шесть основных генотипов вируса и множество субтипов. В нашем регионе в основном распространены 1, 2 и 3 генотипы.

У 75–80 % болезнь переходит в хроническую форму, что вызывает фиброз печени — состояние, при котором ткани печени заменяются соединительной тканью. Фиброз, в свою очередь, приводит к раку или циррозу. Основной путь передачи заболевания — через кровь. Если у человека имеются показания к проведению теста на гепатит С, ему проводят два основных теста. Определяют антитела к вирусу, и при их отсутствии считается, что гепатита у него нет. Если же в крови обнаруживается наличие антител к вирусу гепатита, проводится анализ методом ПЦР.

РНК таким методом определяется в крови уже через 10–12 дней после инфицирования и свидетельствует о том, что вирус активно размножается в организме. В этот период обнаружить вирус другим способом просто невозможно, так как специфических антител он еще не вырабатывает и поражения печени еще незаметны при биохимических анализах и биопсии.

Разновидности исследований методом ПЦР

Анализ методом полимеразной цепной реакции имеет определенные преимущества:

  1. При таком исследовании проводится определение самого вируса, а не продуктов его жизнедеятельности. При этом существует возможность определить вид возбудителя.
  2. Методика обладает высокой специфичностью благодаря тому, что исследуется только определенный участок ДНК, уменьшается вероятность получения ошибочных результатов.
  3. Имеет очень высокую чувствительность, определяется даже минимальное количество вируса в крови.

Существует два основных метода исследования крови на гепатит С при помощи ПЦР: качественный и количественный анализ ПЦР. Качественный метод используется для определения факта наличия вируса. Всем у кого в крови были обнаружены антитела к гепатиту, проводится такой анализ. Результат может быть только двух типов: «обнаружено» и «не обнаружено», последнее значение считается нормой.

Положительный результат теста означает, что в образце были найдены фрагменты РНК вируса, что, в свою очередь, говорит о том, что человек был инфицирован гепатитом. В случае негативного результата возможны два варианта: инфицирования не было или его концентрация настолько мала, что не обнаруживается данной методикой.

Количественный метод отличается по сути исследования, по его задачам и по показаниям. Не все больные гепатитом проходят такой анализ. У него, как и у любого другого, существуют определенные цели. Определение вирусной нагрузки или количественный анализ ПЦР на РНК вируса используется:


  • для определения РНК вируса в крови и постановки диагноза «вирусный гепатит»;
  • для прогнозирования хронизации гепатита и течения болезни;
  • для мониторинга противовирусного лечения и принятия решения о его продлении, сокращении или об изменении тактики лечения.

Исследование проводится при наличии таких показаний:

  • гепатит С обнаружен при качественном исследовании и в крови обнаружены антитела;
  • при микст-гепатитах;
  • если планируется проведение противовирусной терапии;
  • во время и после лечения от гепатита С;
  • при наличии хронического и острого гепатита С.

Тест проводится для оценки количества единиц вируса в заданном объеме образца крови 1 см³ или 1 мл. Результаты приводятся в цифрах. Показатели используются: МЕ/мл, что означает международная единица на миллилитр и копии на мл, количество копий РНК в 1 мл образца. Чем выше количественный показатель анализа, тем большая вероятность передачи вируса другому человеку.

Р-ДНК — метод разветвленной ДНК. Более простой и недорогой метод. Используется для большего количества образцов, имеет невысокую чувствительность, от 500 МЕ/мл. При такой чувствительности есть вероятность не определить вирус, даже если он присутствует в крови.

ТМА — метод транскрипционной амплификации. Такая методика обнаруживает в крови нуклеиновые кислоты. Имеет невысокую стоимость и при этом высокую чувствительность, от 5–10 МЕ/мл. Относительно новая методика, позволяющая ускорить и удешевить процесс тестирования.

Результаты количественного анализа определение РНК вируса, представленные лабораторией, расшифровываются следующим образом:



Источник: http://apechen.ru/diagnostika/virus-gepatita-s-kolichestvennyj-analiz.html

Что показывает количественный анализ на гепатит С?

Диагностировать заболевания печени по внешним признакам или болевым ощущением достаточно трудно.

Это связано с особенностью органа, который практически не имеет нервных окончаний и является терпеливым х различным недугом.

Так дела обстоят и с гепатитами — на начальных стадиях они себя никак не выделяют, лишь при развитии заболевания может проявляться желтуха, повышаться температура и чувствоваться легкая боль в районе печени.

Чтобы с точность поставить диагноз и выбрать метод лечения врач может назначить целый ряд анализов: от анализа крови на антитела до УЗИ печени.



Но, сам гепатит диагностируется по крови, все дополнительные исследования предназначены в основном для понимания насколько вирус повредил печень.

На сеансе доктор может назначить вам количественный анализ на гепатит С. В данной статье мы разберем для чего он назначается, как проходит, возможные результаты и их расшифровку. В конце материала вы найдёте ориентировочную цену на сдачу крови на анализ.

Что это такое?

Такое исследование проводят чтобы понять, как много молекул вируса находится в организме

Количественный анализ — это исследование крови на присутствие гепатита. Он показывает как клеток в организме инфицировано вирусом, развивается ли заболевание или нет.

То есть он показывает концентрацию или нагрузку РНК гепатита С в организме человека в единицах на миллилитр или 1 кубический сантиметр крови.



В отличие от него, качественный анализ помогает определить только присутствие РНК вируса.

В каких случаях делают?

Исследование делается параллельно с качественным анализом после того, как проверка крови на наличие антител к гепатиту (ИФА) показала положительный результат. Делают его несколько раз:

  • при первичной диагностике гепатита С до принятия решения о выборе курса лечения;
  • во время лечения заболевания (обычно на 1, 4, 12 и 24 неделе) для определения клинической картины результатов терапии;
  • после лечения для определения рецидива.

Важность

Количественный анализ является одним из основных видов исследования, на которые врач полагается при выборе методов лечения гепатита. Он служит для того чтобы:

  1. Понять как сильно организм заражен вирусом, количественное присутствие антигенов в теле.
  2. Эффективности выбранной терапии.
  3. Подобрать метод лечения и составить его прогноз.

При этом данный анализ не позволяет судить о степени поражения печени или тяжести течения заболевания для организма. Для этого используют другие исследование, к примеру биохимический анализ крови, эластометрия, биопсия и другие.

Способ и сроки выполнения

Забор крови из вены обычно происходит с утра. Благодаря использованию полимеразной цепной реакции (ПЦР) такое исследование можно назвать одним из самых точных в области определения вируса.



Без использования научной терминологии можно описать процесс так: взятый биоматериал смешивают с определёнными ферментами, которые позволяют скопировать ферменты РНК ил ДНК вируса. Так делают до тех пор, пока не становится достаточно этих молекул для выявления возбудителя.

Срок выдачи результатов отличается в зависимости от медицинского учреждения и его загруженности. Итоги можно подвести спустя 4-5 часов после начало исследования. Поэтому результат могут выдавать уже на следующий день после забора крови.

Чем современней лаборатория, оборудование и реагенты, тем точнее и быстрее можно получить результаты

Подготовка к сдаче крови

Сдача биоматериала на проведение анализа происходит из вены. Особых рекомендаций по подготовке нет, поэтому актуальны стандартные правила, которые нужно соблюдать перед сдачей крови на исследование:

  1. Делать это лучше утром натощак (последний прием пищи должен быть не ранее 8-12 часов до сдачи).
  2. Если забор крови происходит не утром, то на завтрак нельзя употреблять жирную пищу (интервал в 8-12 часов также должен соблюдаться).
  3. Отказаться от алкоголя, жирной и жаренной еды за 1-2 дня до исследования.
  4. Не приходить на анализ на следующий день после праздничного застолья.
  5. Курение запрещено как минимум за час до сдачи биоматериала.
  6. Перед забором крови стоит посидетьминут в спокойствии, чтобы расслабить тело, исключить влияние на результаты напряжения, как физического, так и психологического.
  7. Если принимаете какие-либо лекарственные средства или им подобные препараты, то анализ можно сдавать спустядней после последнего их приема. (об этом факте необходимо сообщить врачу, возможно он установит иное условие).
  8. Биоматериал не сдается сразу после выполнения ректального исследования, рентгенографии, физиотерапевтических процедур.
  9. Первоначальный и повторный анализы лучше сдавать в одной и той же лаборатории (медицинском учреждении), так они разные заведения могут использовать различные реагенты, оборудование, единицы измерения и точность.

Расшифровка результатов

В зависимости от уровня концентрации вируса в организме делают различные выводы касательно терапии заболевания



Далее, определяют эффективность лечения. Если при повторном анализа нагрузка вируса является меньшей, чем 8*105 МЕ/мл, то можно утверждать, что терапия идёт в правильном направлении и в борьбе с заболеванием есть успех.

Говорить о раннем вирусологическом ответе можно при условии снижения количественного присутствия РНК вируса на третий день лечения. Но вероятность этого находится на уровне 85%.

Если же, показатель более 8*105 МЕ/мл, то доктор должен пересмотреть схему лечения и выбрать более подходящую. Соответственно, чем больше уровень, тем сильнее вирус поразил организм и хуже прогноз.

При этом результаты в разных лабораториях могут указываться в МЕ/мл или в копиях на мл. Коэффициент перевода разные (колеблются примерно от 1 до 5) и зависит от метода, использованного для определения количественного показателя. В основном на практике принято, что 1 МЕ/мл = 4 копиям на мл.

Бывают ли ошибки?

К сожалению, диагностика может быть ошибочной. Но это только в том случае, если медицинское учреждение использует устаревшее оборудование, неподходящие реактивы, тогда некоторая доля неправильных результатов присутствует.



Также могут повлиять такие факторы:

  • присутствие гепарина либо ингибиторов в крови;
  • загрязнение биоматериала в процессе выполнения исследования.

При правильной подготовке к анализу в современных лечебных центрах такая вероятность близка к нулю.

К кому обращаться и какая стоимость

Если у вас есть подозрения на гепатит, стоит обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу. В случае надобности они отправят вас к другим врачам.

Цена на такие исследования может быть разной. Кроме того, что она зависит от наценок самих диагностических центров, так и от сложности работы, оборудования и т. д.

В современный лабораториях ориентироваться можно на рублей грн) без стоимости взятия крови из вены. Есть и клиники, которые предлагают выполнить анализ от 300 рублей (около 140 грн).



Примерная форма результатов анализа выглядит таким образом

Заключение

Для подведения итогов статьи выделим главные моменты:

  1. Количественным анализом на гепатит С называют исследование крови на присутствие клеток вируса с указанием его нагрузки.
  2. Показатель измеряется в единицах на миллилитр или 1 кубический сантиметр крови.
  3. Анализ делают как при первичной диагностике, так и последующей для определения эффективности выбранной терапии или выявления рецидива.
  4. Не позволяет говорить про уровень здоровья печени, нарушенного в результате заражения вирусом гепатита С. Для этого могут быть выполнены сопутствующие исследования: биохимический анализ крови, эластометрия, биопсия и др.
  5. В основном сдача крови происходит утром, биоматериал берут из вены.
  6. Не рекомендуется курить, употреблять алкоголь, жирную или жареную пищу перед сдачей анализа. При этом приветствуется соблюдение правил подготовки к исследованию, указанных в статье.
  7. Если анализ показал, что в плазме крови нагрузка вируса более 600 МЕ/мл, то произошло заражение и развитие гепатита С в организме.
  8. В том случае, когда повторные анализы показывают нагрузку более 8*105 МЕ/мл, врач должен пересмотреть схему и способы лечения. Это говорит об отсутствии эффективности выбранной терапии.
  9. Вероятность ошибки при количественном исследовании крайне мала. Однако, возможно загрязнение биоматериала, присутствие в нём ингибиторов или гепарина, что сделает анализ ложным.
  10. Нижний порог стоимости процедурырублей (без цены забора крови) и растёт в зависимости от используемых реагентов, оборудования в лаборатории и других факторов.

Источник: http://pe4en.net/diagnostika-analizy/chto-pokazyvaet-kolichestvennyj-analiz-na-gepatit-s.html

Какие нормы при количественном анализе на гепатит С?

Вирус гепатита С способен размножаться в клетках крови и вызывать лимфопролиферативные болезни. Благодаря множественным мутациям иммунная защита организма ослабевает, возникают генотипы и субтипы вируса. При правильном и своевременном определении конкретного вида зависит эффективность противовирусной терапии. Опасность инфицирования состоит в том, что болезнь протекает бессимптомно. Всего в 15 процентах из 100 могут наблюдаться тошнота и рвота, похудением и повышением температуры.

Определение вируса гепатита С

Стандартная норма гепатита С – это размеры от 40 до 60 нм, с большинством липидов, поражение печени в результате острого или хронического течения болезни. Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др. Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.



Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.

Субтипы могут производить различные модификации, поэтому специфика и чувствительность анализатора должна быть на сто процентов. Помимо обнаружения болезни у пациента, необходимо определить степень его тяжести. Некоторые лаборатории не имеют полностью всех данных по расшифровкам РНК-вируса, есть вероятность ложноположительного ответа.

Исследование на гепатит С будет точнее при изучении таких показателей:

Обратив внимание на результаты этих показателей и общее состояние организма, выводится результат, показывающий степень зараженности, форму, а также количество клеток гепатита С в крови. Это способствует процессу выздоровления и эффективности противовирусной терапии.

Виды анализа на гепатит С

Полиразмерная цепная реакция (ПЦР) дает представление о количестве частиц ДНК во взятых у пациента анализах, при этом правильно определит возбудителя инфекции.



Могут проявиться возбудители инфекционных заболеваний. Такое инфекционное заболевание печени, как гепатит С, в наше время поддается лечению, когда его своевременно обнаруживают. При подозрении на наличие вируса делают ПЦР анализ.

При том, что длительное время симптомы вируса могут маскироваться, человек может не ощущать начала течения болезни. Но при тщательном обследовании в 60–70% случаев выявляется гепатит С, первоочередный анализ, при котором – это ИФА, затем следует ПЦР диагностика. Анализ проводится в определенные периоды, чтобы определить стадию заболевания и назначить соответствующее лечение. Обойтись без этого, не применяя все эти процедуры, можно, прививаясь от гепатита.

Качественный и количественный анализ

Различают анализ качественный и количественный. Суть первого в том, что он определяет присутствие инфекции в крови. А это значит вирус поражает здоровые клетки печени. При обнаружении у больного антител к гепатиту С сразу проводят качественный тест. Норма, которую должен выдать результат – это «в крови не обнаружено». При определении концентрации вируса есть необходимость в знании чувствительности диагностической системы, так как анализ могут делать люди, проходящие противовирусную терапию. Степень чувствительности анализатора не должна быть менее 50 МЕ/мл.

При обнаружении вируса делают количественный анализ, другими словами, вирусную нагрузку, определяющую концентрацию вируса в крови и тяжесть заболевания.

Вирусная РНК, находящаяся в определенном количестве крови, определяется как норма из расчета 1 мл на 1 сантиметр кубический. После количественного определения вирусной нагрузки можно судить о степени заражения еще неинфицированного окружения. Как только концентрация гепатита С повышается в крови, от окружения нужно изолироваться.



Важно на первых этапах обнаружить степень концентрации гепатита, чтобы определиться с темпами реабилитации. Если норма гепатита С превышена на более, чем 800 тысяч МЕ/мл, она считается завышенной, при увеличении до одного миллиона – критической. Если количественный диапазон менее 400 тысяч МЕ/мл, считается, что заражение окружающих произойдет с меньшей вероятностью. Такая цифра дает понять, что гепатит С в организме присутствует в очень маленьких дозах. Анализ не смог определить количественное значение РНК частиц вируса, поэтому его назначают повторно несколько раз для точности диагноза.

Результаты количественного анализа

Задача определения количества вирусной нагрузки в крови пациента – это выявление степени заражения для окружающих.

Результаты анализа ПЦР:

  1. Ответ положительный означает наличие в биологическом материале инфекции. Анализ позволяет определить точное количество инфицированных клеток.
  2. Отрицательный ответ говорит об отсутствии инфекции, которую тщательно искали в организме.

Метод количественного определения на гепатит С является точным и информативным, проводится на оборудовании с высокой чувствительностью. Расшифровка результатов анализа позволяет узнать есть ли инфекция и ее специфику, увидеть наименьшее количество инфицированных клеток на высокочувствительных анализаторах.

Ложноположительные или противоположные результаты анализ редко выдает, чаще это случается при исследованиях иммуноферментного исследования.



Источник: http://pechen1.ru/gepatit/c/kolichestvennyiy-analiz.html

ПЦР гепатита С

Оставьте комментарий 11,647

Гепатит С — это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Для определения болезни используют метод ПЦР гепатита С. Это новая высокотехнологичная методика, что позволяет исследовать генетический материал на существование жизни в мельчайших частицах (молекулах) и наименьших количествах. Вирус гепатита очень стойкий, он способен долго жить в окружающей среде и отлично приживается в организме человека.

Что такое ПЦР?

Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

Виды метода ПЦР

Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.



Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

Особенности количественного ПЦР анализа

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Показания

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

  • определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
  • качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
  • нахождение острого и хронического гепатита С;
  • существование микст-гепатитов;
  • при планировании лечения;
  • если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

Для чего проводится на различных этапах течения болезни?

На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения. При хороших ответах на терапию срок ее сокращают. В противном случае, при медлительном уходе вируса, курс лечения продлевают. ПЦР на гепатит делают на 1,4, 12, 24 неделе терапии. Когда показатели не падают по истечении 12 недель, то делают вывод, что терапия не подходит этому организму. Этот анализ используют для установления, насколько активна инфекция и какая вероятность ее передать. Например, при беременности есть риск заразить малыша. После терапии выявляют риск возобновления болезни.

Расшифровка

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

Норма количественного анализа на гепатит С

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл. Трактовка исхода:

  • низкая концентрация — от 600 МЕ/мл до 3*104 МЕ/мл;
  • средняя — от 3*104 МЕ/мл до 8*105 МЕ/мл;
  • высокая — выше 8*105 МЕ/мл.

Отклонения

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Плюсы метода

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

  • Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
  • Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
  • Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
  • Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
  • Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
  • Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Источник: http://infopechen.ru/gepatity/diagnostika/kolichestvennyj-analiz-na-gepatit-c.html

пцр количественный гепатит с норма

Популярные статьи на тему: пцр количественный гепатит с норма

6 декабря 2002 года в Крымском государственном медицинском университете им. С. И. Георгиевского (г. Симферополь) состоялось заседание Симферопольского терапевтического общества, в работе которого приняли участие.

Вопросы и ответы по: пцр количественный гепатит с норма

ПЦР Вирус гепатита С/кров,якicне визначення, Real-time/выявулено /400копий РНК/мл .Генотип вируса гепатита С 3 РНК. .ПЦР НСV количественны . РНК 7,18 х 10^5 МО/м . . 2,87×10^6 копий/мл Расшифруйте пожалуйста, это результат, на сколько он у меня выше? И какая должна быть норма количественного анализа? Сколько стоит в вашей лаборатории такой анализ? .АNA метод IFT 1:1000 .ПЦР генетика.интерлейкин 28 В / IЛ 28, IЛ28 В/ Аппель rso СС. Апрель rs. ТТ. .АТПО 233,6

.ТТГ. 6.03,после приёма 2 мес l тераксина 25 стал 0,9

.Т4 и Т3 в норме

Печоначная проба белорубин в норме и др показатели тоже кроме АЛТ152, АСТ 131

Общий анализ крови

Тромбоциты падают были 89,сейчас 78,

Гемоглобин повышается был118 ,сейчас153.

Можно ли мне начать противовируную терапию, если падают тромбоциты?

Расшифруйте мне пожалуйста мои анализы! За ранее благодарю!

После этого поехал в частную лабораторию «Авиценна», сдал биохимию и ПЦР качественный (6 мая):

Печёночные пробы в норме:

Билирубин общий — 9.4 Мкмоль/л

Билирубин прямой — 4.2 Мкмоь/л
Билирубин непрямой — 5.2 мкмоль/л

Общий белок — 67.

Потом сдал в той же лаборатории ПЦР колличественный и на 6 маркеров (16 мая):

ПЦР RealTime ДНК ВГ «В» (количественный) — положительный: 7.7х10^2 МЕ/мл.

Маркеры гепатита Б:

Анти HbsAg антитела IgG — 0,049 у.е.О.П. (отрицательный)

Анти Hbcore антитела IgG — 0,047 у.е.О.П. (отрицательный)

Анти Hbcore антитела IgM — 0,041 у.е.О.П. (отрицательный)

Анти Hbe антитела суммарные — 0,045 у.е.О.П. (отрицательный)

HbeAg — 0,041 у.е.О.П. (отрицательный)

HbsAg антиген -1,499 у.е.О.П. (положительный)

Но инфекционист мне сказал, что при положительных ПЦР и HBsAg всё остальное не может быть отрицательным, антитела быть должны. Это ошибка лаборатории и сказал мне пересдать в другой лаборатории на маркеры: HBeAg, HBeAb и HDVAb.

Поехал я в лабораторию «Авиценна», где сдавал в прошлый раз анализы, предъявлять свои обоснованные претензии, ни в какую не захотели признавать свою ошибку. Общался с их врачом (не ифекционист и не гепатолог), он говорит, что такое бывает и что это однозначное носительство. Сколько я с ним не спорил — бесполезно, вынес мне ещё распечатку из протокола. В общем, бесполезно.

Пошёл я в другую лабораторию «Синэво», там один из маркеров на гепатит Б не делают (HBeAb), сделал что было, на гепатит Д HDVAb тоже не делают, делают только ПЦР. Вернулся в Авиценну, там тоже HDVAb не делают. Побежал снова в Синэво лабораторию делать дырку во второй руке, сдать хоть методом ПЦР на гепатит Д. Сегодня перелопатил кучу лабораторий через инет, нигде у нас (в соседнем городе) не нашёл ни в одной лаборатории анализа на HBeAb. Вот результаты последних анализов в лаборатории Синэво:

hbeag — 0.098 (Индекс менее 1.0 – Отрицательный результат. Более или равно 1.0 – Положительный результат).

hbeag, антитела суммарные — 0.007 (Индекс≤ 1.0 — Положительный результат> 1.0 — Отрицательный результат);

hbcorag, антитела igm — 0.067 (Индекс 1.0 — Положительный результат).

ПЦР на гепатит Д — не обнаружено.

Что мне делать, нужно ли мне дальше искать где сдать анализ на hbeab или можно поставить диагноз на основании этих данных?

Вот ещё нашёл в одной лаборатории («Инвитро») спектр услуг:

HBsAg, количественный тест (HBs-антиген, поверхностный антиген вируса гепатита B, «австралийский» антиген);

HBsAg, качественный тест (HBs-антиген, поверхностный антиген вируса гепатита B, «австралийский» антиген);

HBеAg (HBе-антиген вируса гепатита В);

Anti-HBс-total (антитела классов IgM и IgG к HB-core антигену вируса гепатита);

Anti-HBе (Антитела к HBе-антигену вируса гепатита B);

Anti-HBs (антитела к HBs-антигену вируса гепатита B);

Вирус гепатита В, определение ДНК (HBV-DNA) кач. в сыворотке крови;

Вирус гепатита B, определение ДНК (HBV-DNA) кол. в сыворотке крови.

Среди них есть тот антиген, который я недосдал?

Анализатор: TaqMan-48 (Roche Diagnostics, Швейцария). Тест-системы: Roche Diagnostics (Швейцария). Аналитическая чувствительность тест-системы в зависимости от генотипа:

1 генотип: 20 МЕ/мл (54 копии/мл)

2 генотип: 20 МЕ/мл (54 копии/мл)

3 генотип: 10 МЕ/мл (27 копий/мл)

4 генотип: 20 МЕ/мл (54 копии/мл) и биохимию крови. Количество антител три года тому было 16.35, через год выросло до 145 и сейчас 54.25, ПЦР-вирус гепатита C “не обнаружен”, показатели (ALT,AST,GGT,ALP) все это время в норме, только показатели билирубина все время увеличены (общий бывает от 23 до 33, прямой от 4 до 7) также увеличен холестерин 5-9. УЗИ (делаю раз в полгода) все в норме. Но часто беспокоит тяжесть с правой стороны. Врачи к которым я обращался сказали, что никакого специального лечения гепатита мне пока не нужно, у меня застой желчи, назначали препараты (гептрал,гепадиф, урсофальк, расторопша и т.п.), рекомендовали диету и ограничения в алкоголе. Скажите пожалуйста о чем говорят мои результаты анализов, есть ли у меня гепатит С, необходимо ли мне и если да то какое лечение и представляю ли я опасность для своей семьи? Спасибо.

Спасибо за полноценную информацию.

Однако, есть еще несколько анализов, которые могут позволить исключить вирусный гепатит С на момент обследования (этот вопрос вообще можно решить в дистанционном режиме), а вот с гипербилирубинемией и дискомфортом в правом подреберье — надо заниматься только в очном режиме.

У меня были случаи исключения диагноза ВГС — большое удовольствие для всех! С остальным обычно проще, может не проще, но точно дешевле и перспективнее, т.к. современные методы лечения вирусного гепатита С весьма дороги и всегда (!) имеют побочные эффекты.

Вопрос о диете, режиме, потенциальной опасности для семьи, естественно, можно решить лишь после установления диагноза (-ов).

С уважением, Ю. Сухов.

То, что вирус у вас в крови есть, в количестве выше среднего, говорит о том, что процесс в настоящее время активный, показана противовирусная терапия.

Судя по всему, в вашем случае, речь идет о хроническом интегративном гепатитеВ (так называемое носительство HBsAg). Низкая концентрация вируса и нормаль¬ный уровень трансаминаз, свидетельствуют в пользу неактивного носительства вируса, требующего динамического наблюдения без не¬обходимости противовирусного лечения. Однако, т.к. в ПЦР была выявлена ДНК вируса, то активный вирус все же был. Вам рекомен¬дуется исследование уровня ALT каждые 3 месяца в течение одного года, и каждыемесяцев в последующие годы, а также НВеАg тестируется каждыемесяцев. При повы¬шении уровня ALT производится количествен¬ное определение ДНК HBV. Посещение гепатолога/инфекциониста раз в год и прохождение УЗИ гепатобилиарной системы также необходимо.

Необходимости в вакцинации уже нет, т.к. вы уже инфицированы вирусым гепатитом В, вакцинироваться можете предложить вашим близким, елси они ранее не были инфицированы (пусть сдадут анализ на HBsAg и IgG к HBcAg). Вы можете быть источником вирусного гепатита В при его активации. Инфицирование возможно путем гемоконтактов (бытовых в т.ч.) , половым путем, а также мать-дитя.

Источник: http://www.health-ua.org/tag/7308-ptsr-kolichestvenniy-gepatit-s-norma.html

Маркеры гепатита С и расшифровка результатов количественного анализа HCV RNA

В последнее время в поисковиках интернет-ресурсов все чаще появляется запрос «количественный анализ на гепатит с расшифровкой».

Действительно, вирус гепатита распространен и опасен, заболевание поражает печень. Название его произошло от лат. hepatitis — воспаление печени. Заражение происходит через кровь либо половым путем, чаще болеют взрослые люди в возрасте от 25 до 50 лет.

Выделяют несколько типов этого заболевания. Гепатит С не имеет яркой выраженности, но в 40–70% случаев переходит в хроническую форму, способен вызвать цирроз печени и рак. Это заболевание требует точного диагностирования и расшифровки полученных данных, для чего разработаны методики. Одна из них — РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР.

РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР

РНК (рибонуклеиновая кислота) — вид макромолекулы, одна из составляющих живой клетки. РНК отвечает за кодировку генетической информации. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет обыкновение мутировать. Известны 6 его подтипов, а также много субтипов.

Болезнь в своей хронической стадии приводит к фиброзу печени — разрастаются соединительные ткани, структура органа постепенно нарушается. Фиброз поддается своевременному лечению, так как печень не подверглась еще разрушительным процессам. В отличие от цирроза, тяжелого необратимого заболевания печени, в который может перерасти фиброз без принятия необходимых мер вовремя.

Человеку с подозрением на наличие у него вируса гепатита, определяют антитела к нему. Если их нет — заболевание исключается, при их наличии прибегают к методу ПЦР (полимеразной цепной реакции). В молекулярной биологии он является экспериментальным, но занимает ведущее место среди методик диагностирования инфекционных болезней. С помощью него можно значительно увеличить концентрацию фрагментов молекул в пробе. Через 10 дней после инфицирования РНК уже возможно определить в крови.

Этот метод является единственным, позволяющим выявить заболевание на ранних стадиях. Другими способами (напр., биохимическим исследованием крови) это сделать невозможно, так как печень еще не поражена.

Открыл метод в 1993 году биохимик Кэрри Муллис, за что получил Нобелевскую премию. ПЦР стал прорывом в медицине и науке, так как позволил быстро и точно определять инфекции в крови и других биологических материалах человека. Иными словами, метод ускорил развитие диагностики инфекционных заболеваний.

РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР является эффективным по следующим причинам:

  • имеет хорошую чувствительность — определяется даже малое количество вируса в крови;
  • определяется сам вирус, а не побочные продукты, создаваемые им;
  • определяется вид возбудителя.

Отличия количественного анализ HCV RNA от качественного

Метод ПЦР включает два основных способа исследования биологического материала на поиск вируса гепатита С:

Эти исследования имеют различные задачи.

Качественный анализ на гепатит с расшифровкой подтверждает наличие вируса после того как в крови уже найдены антитела к этому заболеванию. Если исследование дало положительный результат, значит, болезнь обнаружена. Иными словами, человек инфицирован. Если получен отрицательный результат, это означает, что человек не инфицирован, либо в наличии слишком маленькая концентрация вируса. Эта концентрация не обнаруживается таким способом.

Помимо этого клиническая картина заболевания строится на основании маркеров гепатита С и расшифровки анализа. Основные маркеры — иммуноглобулины (антитела) M и G. Наличие их в крови пациента указывает на нехарактерный процесс для здорового организма. На основании наличия этих антител больному, как правило, устанавливается первичный диагноз.

Количественный анализ назначается при первичном обнаружении антител и при необходимости проведения лечения.

Также количественный анализ на гепатит С назначают при выявлении микст-гепатитов (заражение сразу несколькими вирусами).

Количественный анализ с расшифровкой проводится с целью:

  • прояснения окончательного диагноза;
  • выстраивания прогнозов относительно течения заболевания и его лечения — продление, сокращение лечения либо изменение тактики;
  • мониторинга терапии.

Чтобы результаты были верными, нужно соблюдать установленный режим перед тем как сдавать кровь:

  • прийти в лабораторию натощак, последний раз принять пищу можно за 8 часов до процедуры;
  • за два дня до исследования запрещен алкоголь, жирные и жареные продукты;
  • ультразвуковые исследования, массаж, физиотерапию перед исследованием проводить нельзя;
  • за день запрещен прием лекарств, если прием отдельных препаратов невозможно отменить, об этом сообщается до забора крови;
  • перед процедурой рекомендуется снизить по возможности физические и нервные нагрузки.

Выполнение этих требований будет залогом получения верных результатов количественного анализа на гепатит С.

Расшифровка количественного анализа

После получения показателей количественного анализа необходимо сделать расшифровку результатов анализов на гепатит С. Результаты вычисляются и в единицах МЕ/мл, и в копиях на мл. Для получения результатов, пересчитанных в копии, применяют несколько методик.

  • HCV Monitor (коэффициент пересчета на МЕ — 2,7);
  • LCX HCV RNA (коэффициент пересчета на МЕ — 3,8).

Таблица. Расшифровка количественного анализа HCV RNA методом ПЦР.

Источник: http://pechenka.online/gepatit/c/analiz-hcv-rna.html

Гепатит с количественный анализ расшифровка

Вирус гепатита С способен размножаться в клетках крови и вызывать лимфопролиферативные болезни. Благодаря множественным мутациям иммунная защита организма ослабевает, возникают генотипы и субтипы вируса. При правильном и своевременном определении конкретного вида зависит эффективность противовирусной терапии. Опасность инфицирования состоит в том, что болезнь протекает бессимптомно. Всего в 15 процентах из 100 могут наблюдаться тошнота и рвота, похудением и повышением температуры.

Определение вируса гепатита С

Стандартная норма гепатита С – это размеры от 40 до 60 нм, с большинством липидов, поражение печени в результате острого или хронического течения болезни. Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др. Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.

Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.

Субтипы могут производить различные модификации, поэтому специфика и чувствительность анализатора должна быть на сто процентов. Помимо обнаружения болезни у пациента, необходимо определить степень его тяжести. Некоторые лаборатории не имеют полностью всех данных по расшифровкам РНК-вируса, есть вероятность ложноположительного ответа.

Исследование на гепатит С будет точнее при изучении таких показателей:

Обратив внимание на результаты этих показателей и общее состояние организма, выводится результат, показывающий степень зараженности, форму, а также количество клеток гепатита С в крови. Это способствует процессу выздоровления и эффективности противовирусной терапии.

Виды анализа на гепатит С

Полиразмерная цепная реакция (ПЦР) дает представление о количестве частиц ДНК во взятых у пациента анализах, при этом правильно определит возбудителя инфекции.

Могут проявиться возбудители инфекционных заболеваний. Такое инфекционное заболевание печени, как гепатит С, в наше время поддается лечению, когда его своевременно обнаруживают. При подозрении на наличие вируса делают ПЦР анализ.

При том, что длительное время симптомы вируса могут маскироваться, человек может не ощущать начала течения болезни. Но при тщательном обследовании в 60–70% случаев выявляется гепатит С, первоочередный анализ, при котором – это ИФА, затем следует ПЦР диагностика. Анализ проводится в определенные периоды, чтобы определить стадию заболевания и назначить соответствующее лечение. Обойтись без этого, не применяя все эти процедуры, можно, прививаясь от гепатита.

Сначала идет качественный анализ, который лишь подтверждает гипотезу насчет инфицирования, а затем количественный, определяющий нагрузку на печень. Идеальным вариантом будет отрицательный результат на гепатит С в генетическом материале пациента.

Качественный и количественный анализ

Различают анализ качественный и количественный. Суть первого в том, что он определяет присутствие инфекции в крови. А это значит вирус поражает здоровые клетки печени. При обнаружении у больного антител к гепатиту С сразу проводят качественный тест. Норма, которую должен выдать результат – это «в крови не обнаружено». При определении концентрации вируса есть необходимость в знании чувствительности диагностической системы, так как анализ могут делать люди, проходящие противовирусную терапию. Степень чувствительности анализатора не должна быть менее 50 МЕ/мл.

При обнаружении вируса делают количественный анализ, другими словами, вирусную нагрузку, определяющую концентрацию вируса в крови и тяжесть заболевания.

Вирусная РНК, находящаяся в определенном количестве крови, определяется как норма из расчета 1 мл на 1 сантиметр кубический. После количественного определения вирусной нагрузки можно судить о степени заражения еще неинфицированного окружения. Как только концентрация гепатита С повышается в крови, от окружения нужно изолироваться.

Важно на первых этапах обнаружить степень концентрации гепатита, чтобы определиться с темпами реабилитации. Если норма гепатита С превышена на более, чем 800 тысяч МЕ/мл, она считается завышенной, при увеличении до одного миллиона – критической. Если количественный диапазон менее 400 тысяч МЕ/мл, считается, что заражение окружающих произойдет с меньшей вероятностью. Такая цифра дает понять, что гепатит С в организме присутствует в очень маленьких дозах. Анализ не смог определить количественное значение РНК частиц вируса, поэтому его назначают повторно несколько раз для точности диагноза.

Что такое ПЦР?

Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

Виды метода ПЦР

Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.

Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

Особенности количественного ПЦР анализа

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Показания

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

  • определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
  • качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
  • нахождение острого и хронического гепатита С;
  • существование микст-гепатитов;
  • при планировании лечения;
  • если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

Для чего проводится на различных этапах течения болезни?

На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения. При хороших ответах на терапию срок ее сокращают. В противном случае, при медлительном уходе вируса, курс лечения продлевают. ПЦР на гепатит делают на 1,4, 12, 24 неделе терапии. Когда показатели не падают по истечении 12 недель, то делают вывод, что терапия не подходит этому организму. Этот анализ используют для установления, насколько активна инфекция и какая вероятность ее передать. Например, при беременности есть риск заразить малыша. После терапии выявляют риск возобновления болезни.

Расшифровка

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

Норма количественного анализа на гепатит С

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл. Трактовка исхода:

  • низкая концентрация — от 600 МЕ/мл до 3*104 МЕ/мл;
  • средняя — от 3*104 МЕ/мл до 8*105 МЕ/мл;
  • высокая — выше 8*105 МЕ/мл.

Отклонения

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Плюсы метода

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

  • Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
  • Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
  • Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
  • Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
  • Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
  • Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Когда назначается анализ на определение вирусной нагрузки?

Данное исследование назначается врачом в случае положительного ответа при диагностике гепатита С. Как правило, оно назначается одновременно с анализом на определение генотипа вируса гепатита С. О чем говорит расшифровка количественного анализа на гепатит С? В первую очередь, этот анализ говорит о том, насколько пациент инфицирован и, соответственно, заразен. Количественное определение вируса в крови позволяет также определить, насколько эффективна применяемая схема терапии. Врачи назначают его после 4, 12 и 24 недель лечения. Снижение уровня вирусной нагрузки говорит о том, что терапия выбрана правильно. Также анализ назначается после 24 недель от момента завершения терапии.

Исследования показали, что степень вирусной нагрузки не всегда влияет на скорость развития патологических процессов в печени. Случаи носительства вируса свидетельствуют о том, что сам человек может и не болеть гепатитом С, но являться источником заражения других людей. Кроме того, носители в любой момент могут стать и больными. Вирус гепатита С активизируется при снижении иммунитета, например, после перенесенного ОРВИ, гриппа, сильного стресса или переохлаждения.

Гепатит С способы передачи

Заразиться гепатитом С можно:

  • через кровь. Возможно инфицирование при переливании зараженной крови, при проведении операций и манипуляций с кровью, лечении зубов, удалении родинок и бородавок, если были допущены погрешности в стерилизации инструментов;
  • в салонах красоты при выполнении тату, пирсинга, обрезного маникюра и педикюра, косметологической чистки лица и др.;
  • от матери к ребенку во время родов (5%);
  • во время незащищенного секса с инфицированным человеком;
  • во время принятия инъекционных наркотических средств не одноразовыми шприцами;
  • во время оказания первой помощи инфицированному вирусом человеку, если не соблюдать меры безопасности
В отличие от других гепатитов способы передачи гепатита С в основном связаны с кровью. Бытовым путем заразиться гепатитом С невозможно! Ни рукопожатия, ни обычные поцелуи (несексуального характера) и общение, ни пользование предметами бытового назначения не могут передать гепатит С! Не стоит только брать маникюрные и бритвенные принадлежности у человека, который страдает гепатитом С! При оказании первой помощи при травмах пациентам с гепатитом С нужно обязательно надевать перчатки! Вирус погибает при кипячении через пару минут, а при стирке при температуре 60 °С – через тридцать минут. Замораживание не убивает вирус. Убийственно воздействует на вирус УФ-излучение. Через 16 часов вирус при комнатной температуре погибает!

ПЦР диагностика

ПЦР – наиболее распространенный и точный метод определения вируса и его количественных возможностей. Метод способен определять вирусы в разных формах и диагностировать малоизвестные заболевания.

Анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) осуществляется путем забора крови и определения в ней вирусной РНК.

В образцы крови добавляются специфические ферменты и определяются в специальный реактор. Там происходит клонирование клеток.

Сначала одна клетка делится на две копии, потом каждая из копий делится еще на две. Таким образом, после синтеза копий появляются сотни клеток ДНК.

ДНК можно сравнить с базой информации о всевозможных возбудителях и выявить инфекцию на ранних сроках заболевания.

Преимущества ПЦР метода:

  • многие методы диагностики выявляют только наличие вируса путем выделения в крови продуктов жизнедеятельности инфекционных микроорганизмов. Метод ПЦР напрямую указывает на возбудителя инфекции;
  • специфика ПЦР заключается в том, что в исследуемой пробе крови выявляется уникальный фрагмент ДНК. Это исключает шанс на ложный результат;
  • ПЦР способно выявить даже единичные клетки инфекции и диагностировать несколько возбудителей в одной пробе крови.

Качественный анализ

Помогает обнаружить вирус в крови. При положительном результате следует продолжить обследование и провести количественный анализ, который определит стадию болезни, и предоставит врачам возможность спланировать наиболее благоприятную тактику лечения. При проведении данного анализа допускаются только два заключения:

  • «Обнаружено». Свидетельствует о наличии вируса в крови. Подобный результат считается положительным. В крови уже выявлен РНК вируса, который уже начал развиваться, заражая здоровые клетки и поражая печень.
  • «Не обнаружено». Говорит о том, что в пробе крови отсутствуют РНК гепатита С. Также существуют случаи, что в исследуемом образце концентрация вируса ничтожно мала и не попадает в рамки чувствительности анализа. Стоит заметить, что анализ выявляет инфекцию на 10-й день после инфицирования, что дает возможность определить вирус еще до его существенных внешних проявлений.

Количественный анализ

Выявляет концентрацию генетического материала вируса в определенном объеме крови. Это не только дает возможность определить тяжесть болезни, но и позволяет увидеть полную клиническую картину заболевания (в том числе при лечении). В результате проведения данного анализа могут быть только 3 заключения:

Результат «Положительный». Результат в числовом показателе отражает вирусную нагрузку. Концентрация вируса определяет количество вируса в 1 миллилитре, что равно 1 кубическому сантиметру крови. Единицы измерения данного анализа МЕ/мл (международные принятые единицы на миллилитр). Если концентрация вирусных частиц меньше 8хМЕ/мл, то лечение эффективно, если же наоборот, то стоит изменить тактику лечения.

Если вирусная нагрузка в течение первых недель терапии падает до 60 %, то эффективность лечения является высокой. Низкий уровень равен доМЕ/мл, а высокий от МЕ/мл. Вирусная нагрузка определяет степень заболевания и возможность его передачи. При высоком уровне концентрации вирусных клеток в крови риск передачи заболевания вертикальным или же половым путем достаточно велик.

  • Результат «Недействительный». Этот результат означает, что при качественном анализе вирус в организме был обнаружен, но количественный анализ не смог определить его концентрацию в крови. Такое происходит, когда количество частиц РНК вируса в крови ниже диапазона определения.
  • Результат «Не обнаружено». Расшифровка анализа означает отсутствие РНК клеток гепатита С в образце крови.

Количественный анализ ПРЦ проводится на всех стадиях болезни. Для выявления оптимального лечения анализы проводятся на сроках: (4-я, 12-я, 16-я, и 24-я неделя). Если по результатам наблюдается снижение вирусной нагрузки, то лечение можно считать эффективным. После завершения терапии количественный анализ проводится для обнаружения рецидива, то есть, обнаружения вируса после снижения его активности до минимума.

01 Принципы диагностики ВГС

Серологическая диагностика гепатита С основана на обнаружении в образцах плазмы крови человека уникальных маркеров вируса гепатита С: антител к антигенам ВГС, относящихся к иммуноглобулинам классов G и M (анти-ВГС-IgG и анти-ВГС-IgM), и нуклеиновой кислоты возбудителя (РНК ВГС).

Принцип метода основан на обнаружении в исследуемом материале специфичных фрагментов ДНК (РНК) различных биологических объектов, их избирательном синтезе и дальнейшей детекции продуктов реакции амплификации этих фрагментов.

Количественные модификации ПЦР дают представление о ВН, имеющей решающее значение для прогноза и контроля терапии вирусного гепатита С.

02 Подсчет уровня вирусной нагрузки при вирусном гепатите С

Обычно РНК ВГС может определяться в крови уже в первую неделю после заражения, до появления анти-ВГС (анти-HCV), которые могут не выявляться в течение первых 8–12 недель. Оба маркера ВГС-инфекции могут обнаруживаться в крови в различных сочетаниях, что требует правильной клинической интерпретации.

Поэтому для формирования окончательного диагноза целесообразно, особенно при выявлении только одного из двух маркеров ВГС, проводить повторное тестирование образца крови на анти-ВГС и РНК ВГС.

В ходе исследования выполняется детекция и подсчет числа копий РНК ВГС методом ПЦР в реальном времени.

В клинической практике наиболее совершенным методом ПЦР-диагностики является REAL-TIME ПЦР, которая исключает загрязнение образцов и дает заключение о наличии и количестве РНК ВГС через две недели после предполагаемого инфицирования. Эта методика, кроме прочего, определяет генотип вируса с вирусной нагрузкой за одно исследование. Клиническая специфичность теста составляет 100%. Стандартный интервал значений теста от 15 до МЕ/мл. Выявляются генотипы вируса 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6). Порог положительного теста, когда может быть обнаружена РНК вируса, составляет 15 МЕ/мл. Основным преимуществом метода ПЦР является очень высокая чувствительность анализа – до 1 копии геномной ДНК возбудителя инфекции в исследуемой пробе в nested-модификации ПЦР.

ПЦР – современный, высокочувствительный метод. Но его достоинство – высокая чувствительность — является одновременно и его уязвимостью, т. е. приводит к ложным результатам даже при выполнении анализа высококвалифицированными специалистами в хорошо оснащенных лабораториях. Результаты исследований в разных лабораториях часто не совпадают, что указывает на необходимость стандартизации диагностических систем для ПЦР-диагностики и повышенного внимания к проведению данного вида исследований. Высокая стоимость, длительность анализа, сложность метода и несовпадение результатов, полученных в разных лабораториях, ограничивают использование ПЦР в широкой практике.

Результаты исследования выдаются на бланке с таблицей, в которой указан выявленный уровень РНК вируса (количество копий или концентрация в МЕ/мл). Для выражения величины МЕ/мл могут быть использованы и другие математические символы, например, 1. 9*10^5 (1. 9 на 10 в 5 степени).

03 Показания к исследованию

Основными показаниями к определению вирусной нагрузки при вирусном гепатите С являются:

  • лабораторно подтвержденное качественное наличие РНК возбудителя в сыворотке крови;
  • наличие у лечащего врача вопросов в выборе схемы применения противовирусных препаратов;
  • необходимость в точной оценке эффективности лечения.

Исследование не требует специальной подготовки пациента.

04 Интерпретация результатов

В норме у здорового человека отсутствует РНК возбудителя, то есть ВН равна нулю. ВН выражается в Международных единицах на мл. Выделяют большую ВН (>МЕ/мл) и маленькую ВН (<МЕ/мл). Расшифровку результата (в зависимости от конкретной тест-системы) можно выразить в следующей таблице:

Источник: http://pechen5.ru/gepatit/gepatit-s-kolichestvennyj-analiz-rasshifrovka.html