Rna hcv гепатит с кач что это

Качественный анализ на гепатит С



Оставьте комментарий 4,881

Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус.

Оглавление:

В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям. Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности. В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

Что такое РНК вирус?

Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь. В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет. Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию. При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель. Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.



Когда делается: показания к исследованию

В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

  • выявление признаков воспаления печени;
  • скрининговые исследования с целью профилактики;
  • обследование контактирующих людей;
  • диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
  • определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
  • цирроз печени;
  • для определения эффективности назначенного лечения.

Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания. Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

Особенности качественного ПЦР анализ на гепатит С

Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование. Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови. Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать. Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве. При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.



Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

  • подозреваются скрытые формы гепатита С;
  • диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
  • в случае выздоровления;
  • для выявления ранней стадии заражения.

Расшифровка анализа

На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде. Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение. Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

Диагностируя вирус гепатита, рекомендуется применять комплексное обследование.

Норма показателей

Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции. В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы. Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

Отклонения

Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях. Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов. Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.



Источник: http://infopechen.ru/gepatity/diagnostika/ptsr-na-gepatit-c.html

Диагностика вируса гепатита С

Вирус гепатита С (ВГС) – является РНК-содержащим вирусом из семейства Flaviviridae. Эта инфекция способна размножаться в клетках крови (моноцитах, нейтрофилах, В-лимфоцитах и макрофагах), а также поражать клетки самой печени – гепатоциты. Благодаря высокой степени мутационной активности данный тип гепатита способен избегать воздействия иммунной системы человека.

Есть 11 генотипов и масса субтипов такого вируса, которые отличаются степенью поражения печени и влияют на сроки лечения гепатита. Подобное разнообразие гепатита С требует различных методик противовирусной терапии. К примеру, гепатит 1-го и 4-го генотипов необходимо лечить 48 недель, а для курса терапии против вирусов 2-го и 3-го видов может потребоваться лишь 24 недели.

После того, как экспресс-тест на гепатит С дал положительный результат, проводят анализ ПЦР с целью выявления РНК данного вируса в пробах крови.

ПЦР-диагностика

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) называется экспериментальная методика для выявления вирусов. Такой анализ на гепатит С позволяет существенно увеличить концентрацию некоторых фрагментов ДНК или РНК вируса в сданных пробах. Это дает возможность их распознать и даже подсчитать количество.



Данный тест на гепатит С выполняют по следующей методике:

  1. Проба крови (генетический материал), который может содержать искомый ген гепатита, вносится в пробирку. К ней помещают специальные вещества – праймеры, они представляют собой отрезки небольшой длины из искомого гена, которые синтезированы химическим путем. В данный сосуд также добавляется ДНК или РНК полимераза, она способна выстраивать цепочки из нуклеиновой кислоты, полностью идентичные первоначальной. К полученному составу добавляется и подборка из свободных нуклеотидов, являющихся особым строительным материалом для ДНК и РНК, причем один из них содержит мельчайшие частицы из радиоактивного фосфора.
  2. Полученная смесь вначале подогревается до 95 градусов, вследствие чего переплетенные в обычном состоянии обе спирали ДНК из-за такого воздействия расплетаются.
  3. Для продолжения анализа препарат охлаждается, в этот момент праймеры прикрепляются к искомому участку генома вируса гепатита, не позволяя ДНК сформироваться в двойную спираль. Когда происходит остывание смеси, полимераза отыскивает именно одиночные цепочки из нуклеотидов. Во время прикрепления данного фермента он скользит по цепи ДНК (как блок по веревке), а на двойной спирали он не способен «работать», для этого и проводят подогрев смеси.
  4. Чтобы продлить анализ, выполняют повторное нагревание, которое вновь приводит к разделению цепочек нуклеотидов. При выполнении таких циклов ПЦР в пробе количество искомых генов гепатита возрастает в геометрической пропорции, а остальные генетические материалы продуцируются (формируются) лишь в линейной закономерности.
  5. Для завершения исследования проводят очистку раствора от остаточных частиц нуклеотидов. Их разделяют с помощью электрофореза, при этом происходит отделение по параметрам молекулярной массы цепочек ДНК. Такие анализы на гепатит с при помощи ПЦР позволяют определить, присутствуют искомые гены вируса в исследуемом образце или нет.

Достоинством данного теста является очень высокий порог чувствительности реакции ПЦР. Такой методике для проведения диагностики, в идеальном варианте, требуется всего одним геном вируса на всю пробу.

Кроме того, такая ПЦР полностью специфична. В каждом из генов есть уникальная последовательность из нуклеотидов, которая, как отпечаток пальца, не может нигде повторяться. Для этого анализа на гепатит С праймеры синтезируются таким образом, чтобы они абсолютно соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у одной другой последовательности.

Данная методика позволяет также провести анализ на гепатит в с и детерминировать их, помогая установить окончательный диагноз.

Такой лабораторный анализ позволяет получить информацию большую, чем просто наличие или отсутствие РНК вируса гепатита С либо другого типа в пробах крови. Определяя параметр радиоактивного излучения, существует и возможность выявлять, сколько искомого генетического материала изначально находилось в исследуемом образце. Это позволяет определить параметр так называемой вирусной нагрузки – концентрации частиц РНК гепатита в определенном объеме.



Качественный анализ ПЦР

Данный анализ позволяет определить факт наличия вируса гепатита в пробах крови. Его необходимо проводить для всех людей, у которых были обнаружены антитела к гепатиту.

В результате проведения такого исследования могут быть только два значения:

  • «Обнаружено». Такой положительный результат теста интерпретируется следующим образом: в анализируемом образце из биологического материала были найдены фрагменты РНК вируса гепатита. Из этого следует, что был факт инфицирования пациента данным вирусом. Это может свидетельствовать о том, что возбудитель гепатита размножается в организме и заражает новые клетки, разрушая печень.
  • «Не обнаружено». Этот результат говорит, что в образце, который анализировался в данной лаборатории, не были обнаружены фрагменты РНК, которые специфичны для вируса гепатита С. Есть также вероятность, что концентрация РНК вируса-возбудителя в исследуемом образце была настолько мала, что тест не смог ее выявить. В таких случаях говорят, что уровень концентрации находится ниже порога чувствительности анализа.

Такой тест может быть также и ложноположительным или ложноотрицательным, из-за загрязнения биоматериала или наличия в пробах специфических веществ, реагирующих с химическими компонентами, необходимыми для проведения анализа.

Следует подчеркнуть, что в острых фазах гепатита С качественное исследование по методу ПЦР может выявлять его РНК уже после 1-2 недель от момента инфицирования организма. Это значит, что выявлять болезнь можно задолго до проявления ее внешних симптомов или появления в организме антител к гепатиту.

Забор крови (из вены) желательно выполнять натощак.

Количественный анализ ПЦР

При помощи данного анализа определяют уровень концентрации вируса гепатита у больного (вирусную нагрузку). Такой тест нужно сдать, чтобы оценить количество РНК вируса в единице определенного объема.

Расшифровка анализов на гепатит с, проведенная по такой методике, может иметь следующие результаты:

  • Количественный показатель (в цифрах)

Концентрация вируса (количество) приводится в цифровом выражении. Для этого используются разные показатели единиц измерения: либо МЕ/мл (международная единица на миллилитр), либо копий/мл (количество копий РНК вируса в миллилитре). В среднем 1 МЕ/мл соответствует 4 копиям/мл, поскольку разные тест системы имеют различные коэффициенты перевода таких единиц измерения.

Низким уровнем вирусной нагрузки считают значения данного анализа меньшеМЕ/мл, а высоким является показательМЕ/мл.

Такая количественная оценка позволяет определить уровень инфекционности заболевания («заразность») больного. Чем больше этот показатель анализа, тем выше вероятность риска передачи возбудителя другим людям (при половом контакте или вертикальным путем).



Этот вердикт означает, что количественный метод не смог обнаружить РНК гепатита, однако сам вирус присутствует в организме, только в очень малой концентрации. Это было подтверждено проведением дополнительного качественного анализа ПЦР, и он своим положительным результатом свидетельствует о факте присутствия гепатита.

  • Результат «Не обнаружено»

    Данная положительная расшифровка анализа говорит о том, что сам количественный тест в пробе крови не смог обнаружить специфических РНК частиц вируса гепатита С.

  • Количественный анализ ПЦР, проводимый на разных сроках противовирусной терапии (1-я, 4-я, 12-я и 24-я недели) позволяет судить об эффективности лечения и делать необходимые поправки.

    Специфика анализа

    Данный тест нужно сдать, чтобы определить различные генотипы гепатита С. В настоящее время известно 11 генотипов данного возбудителя и множество субтипов. В нашей стране распространены генотипы гепатита С 1-го, 2-го и 3-го видов. В лабораториях могут выявлять разнообразные субтипы этих видов: 1а, 1в, 2а, 2в, либо 3, 4, 5, 6 генотипы с различными модификациями субтипов. Для всех этих гепатитов специфичность определения составляет 100%.

    Уточнение модификации генотипа дает возможность подбирать соответствующее лечение. Наличие у больного тех или иных видов генотипа не свидетельствует от том, что заболевание легче или сложнее, они являются лишь разновидностями вируса гепатита, и не больше.

    В тех случаях, когда в лаборатории не могут выделить генотип вируса, может быть выдан результат: «Не типируется. Были исследованы генотипы: такие-то» (к примеру, 1а, 2в, 3ав). Эта расшифровка говорит о том, что в данной лаборатории не было соответствующих реагентов, которые смогли бы детерминировать генотип вируса гепатита. При исследовании проводилась проверка на вирусы, данные в перечне, но соответствия их с образцами РНК не были выявлены.

    

    Чтобы поставить окончательный диагноз, недостаточного лишь одного вида анализа. Каждый из тестов может дать ложноположительный результат. Для точного определения типа гепатита и степени поражения этой инфекцией организма проводят комплексное исследование. При этом делается биопсия печени и тестирование ее ферментов: АлАТ, АсАТ, а также ЩФ и ЛДГ. Может выполняться также тест на билирубин и анализ протромбинового индекса.

    Лишь комплекс таких тестов и лабораторных исследований, с общим анализом состояния больного поможет определить наличие гепатита в организме, его форму, а также степень выраженности. На их основании доктор может определить дальнейшее лечение и сделать возможный прогноз для больного.

    Источник: http://veneradoc.ru/gepatity/rnk-virusa-gepatita-s.html

    Качественный анализ ПЦР на гепатит С

    Гепатит – серьезное заболевание, которое имеет множество причин для возникновения. В основе его развития лежит прямое или опосредованное поражение печени. Учитывая ее важность для всего организма, можно только догадываться, насколько тяжело протекает патология. В этой статье более подробно разберем особенности течения и лабораторную диагностику гепатита С.

    Причиной болезни является вирусный агент, который относится к РНК-содержащим возбудителям. Он имеет отличительную черту – способность мутировать, то есть изменять свою структуру. Благодаря этому инфекция ускользает от атаки иммунной системы и в большинстве случаев приводит к хронизации воспалительного процесса в печени.

    

    Учитывая существование различных подтипов вируса, подбор лекарственных средств должен проводиться с учетом результатов генотипирования. Несмотря на длительное изучение болезни и особенностей строения HCV, до сих пор не удалось разработать специфическую прививку от заболевания.

    Трудности ранней диагностики заключаются в бессимптомном течении гепатита, вследствие чего человек обращается к врачу на стадии цирроза. Чтобы вовремя обнаружить заболевание, требуется регулярное проведение медосмотров. Только путем лабораторного исследования крови удается выявить HCV и предупредить заражение окружающих. Дело в том, что носитель инфекции может длительное время не догадываться о патологии и продолжать передавать вирус здоровым людям.

    Пути передачи

    Вирус в большинстве случаев распространяется через кровь, так как в ней содержится наибольшая концентрация патогенных агентов. Таким образом, инфекция передается:

    • при гемодиализе;
    • при уколе зараженной иглой;
    • в процессе драки, когда травмируются кожные покровы, и происходит гемоконтакт;
    • при гемотрансфузии (переливании крови).

    Вероятность заражения при интимной близости незначительная, так как в сперме и выделениях из влагалища содержится небольшое количество возбудителей. Риск инфицирования существенно увеличивается при нарушении целостности слизистой гениталий. Такое наблюдается при агрессивном и анальном сексе.

    Что касается вертикального способа передачи инфекции, то он осуществляется в процессе родовой деятельности. В периоде вынашивания плода возбудитель не может проникнуть через плаценту к эмбриону. При естественных родах патогенный агент передается ребенку при травмировании его кожи, когда наблюдается контакт с кровью матери.

    

    После проникновения возбудителя в здоровый организм начинается синтез антител, которые являются защитой от инфекции и относятся к иммунным структурам. Именно они обнаруживаются при первичном исследовании человека с помощью ИФА.

    Для подтверждения диагноза пациенту проводится полимеразная цепная реакция. Она представляет собой анализ на выявление генетического материала патогенного агента и определение вирусной нагрузки.

    Лабораторная диагностика гепатита С

    Лабораторная диагностика начинается с проведения иммуноферментного анализа. Основная его задача заключается в обнаружении антител, вырабатывающихся против возбудителя. Его эффективность – почти 95%. Благодаря этому исследованию на доклинической стадии удается выявить вирусоносителя и направить его на дальнейшее обследование.

    Качественный анализ ИФА указывает на наличие или отсутствие иммуноглобулинов в крови пациента. Его результат может быть «положительный» или «отрицательный». Получив первый вариант ответа, человек направляется на следующее обследование – ПЦР. Его цена зависит от качества реактивов и лаборатории. Стоимость полимеразной цепной реакции может достигать 4 тысяч рублей.

    Особенности ПЦР

    С помощью полимеразной цепной реакции даже небольшой объем биологического материала позволяет оценить вирусную нагрузку в крови, то есть подсчитать концентрацию возбудителей в одном миллилитре жидкости.

    С появлением ПЦР диагностика гепатита значительно упростилась. Анализ дает возможность выявить РНК HCV, установить стадию инфекционного процесса и заразность вирусоносителя.

    

    Существует несколько разновидностей генетической диагностики:

    1. качественный анализ ПЦР на гепатит С – подтверждает факт наличия или отсутствия HCV в крови обследуемого:
    2. количественный, благодаря которому можно подсчитать концентрацию вирусов и установить стадию болезни. Результат выдается в МЕ/мл или копии/мл (в зависимости от лаборатории);
    3. генотипирование – необходимо для определения генотипа HCV. Это требуется для точного подбора лекарственных средств, которые будут максимально эффективны в данном случае. Анализ косвенно указывает на тяжесть патологического процесса в печени. Так, при третьем генотипе возбудителя чаще всего наблюдается стеатоз, в основе развития которого лежит накопление жира в гепатоцитах (ее клетках). Помимо этого, тип вируса влияет на результат и продолжительность терапевтического курса.

    Качественный анализ ПЦР на гепатит С

    Первым делом в лаборатории биологический материал исследуется на наличие РНК HCV. Важно помнить, что качественный анализ на гепатит С имеет определенный уровень чувствительности, в связи с чем не всегда может давать верный ответ. В таком случае рекомендуется повторное проведение лабораторной диагностики с применением других реактивов.

    Для получения достоверных результатов следует использовать тест-системы с чувствительностью – не ниже 50 МЕ/мл.

    Результат диагностики может быть как «положительный», так и «отрицательный». Если возбудитель не найден в крови, исследование завершается. При выявлении патогенного агента в образце далее проводится количественный подсчет вирусной нагрузки.

    Ложноотрицательный ответ получается, когда нарушается технологический процесс, например, в среду попадают активные компоненты, угнетающие построение копий возбудителя. Таким образом не удается отобразить истинную картину крови, из-за чего инфицирование человека не диагностируется.

    

    Ложноположительный результат можно получить, если пробирка для забора биологического материала, а также среда для проведения исследования были загрязнены. Помимо этого, такой ответ анализа возможен при микст-инфекции, когда печень поражается несколькими вирусами, например, гепатитом С и D.

    Показания для качественного исследования

    Врач может назначать пациенту качественное исследование на выявление РНК вируса гепатита С:

    • при получении положительного или сомнительного ответа иммуноферментной диагностики;
    • для верификации диагноза;
    • определения вирусной нагрузки;
    • постановки стадии заболевания;
    • диагностики микст-инфекции. Зачастую гепатит С поражает печень одновременно с вирусом «D»;
    • определения терапевтической тактики с учетом генотипа возбудителя;
    • оценки динамики изменений на фоне лечения противовирусными медикаментами.

    К преимуществам полимеразной цепной реакции относится:

    1. высокая чувствительность методики, что позволяет установить факт инфицирования на доклинической стадии;
    2. выявление генетического материала возбудителя, а не антител к нему;
    3. возможность установления субтипа патогенного агента;
    4. высокая скорость диагностики, так как не требуется посев материала на питательную среду, а достаточно использовать специфические тест-системы. Человек получает результат спустя 5 часов;
    5. универсальность. Анализ позволяет выявить любой генетический материал (РНК, ДНК). Благодаря этому врач может подтвердить гепатит С и другие виды болезни (В);
    6. возможность выявления скрытой инфекции.

    Количественное исследование

    При исследовании крови с помощью полимеразной цепной реакции удается подсчитать количество возбудителей в фиксированном объеме биологического материала. Показатель представлен в МЕ/мл. Благодаря анализу можно установить степень заразности пациента, определить стадию инфекционного процесса, а также оценить эффективность лекарственной терапии.

    На основании ПЦР специалист решает, какие дозы медикаментов позволяют блокировать размножение возбудителей. Кроме того, определяется длительность противовирусного лечения и прогноз для жизни. Важно помнить, что тест-системы имеют высокую чувствительность, поэтому метод дает возможность подтвердить инфицирование человека еще на доклинической стадии.

    

    Генотипирование

    Учитывая способность возбудителя мутировать, для определения тактики лечения и выбора противовирусных лекарств необходим его генотип. Например, лечение гепатита HCV 1 длится 48 недель, при этом положительная динамика отмечается лишь в 60% случаев. Генотипы 2 и 3 имеют более благоприятный прогноз. Противовирусные лекарства назначаются на 8 месяцев, а их эффективность достигает 85%.

    Согласно статистическим данным, в большинстве случаев на территории Российской Федерации регистрируется HCV 1, 2 и 3.

    При расшифровке лабораторного исследования может быть указан такой ответ – «не типируется». Это значит, что в кровеносной системе больного циркулирует вирус, которого не удается распознать тест-системой. Результат анализа в данном случае свидетельствует о заражении человека нетипичным для данной географической зоны возбудителем.

    Как получить достоверные результаты?

    Чтобы качественное исследование ПЦР по выявлению РНК возбудителя гепатита С показало правильные результаты, необходимо соблюдать требования по подготовке к лабораторной диагностике:

    1. забор крови осуществляется натощак, причем «голодный» промежуток не должен быть короче 8-ми часов;
    2. за два дня до исследования рекомендуется прекратить распитие спиртных напитков и отказаться от острых, жирных и копченых блюд;
    3. отменить введение лекарственных средств, снижающих свертываемость крови, например, гепарина. Если данные медикаменты назначены по жизненным показаниям, необходимо предупредить об этом врача. Кроме того, специалист должен знать о приеме других препаратов, которые могут повлиять на результат лабораторного исследования;
    4. накануне забора биологического материала не следует проводить физиотерапевтические процедуры и подвергать себя тяжелой физической нагрузке.

    На результаты анализа может влиять не только человек, сдающий кровь, но и другие факторы, а именно:

    
    • некачественный забор крови;
    • несоблюдение рекомендаций по транспортировке биологического материала;
    • недостаточная профессиональная подготовка работников лаборатории;
    • несоблюдение техники проведения исследования;
    • введение антикоагулянтов (гепарина) накануне забора крови. Данная группа лекарств снижает свертываемость, тем самым замедляя работу реактивов.

    В разных лабораториях ответ диагностики может несколько отличаться, однако эти погрешности не влияют на конечный результат исследования.

    Особое внимание уделяется видам тест-систем, которые используются в лаборатории. Зачастую предпочтение отдается реактивам с высокой чувствительностью. Это важно для пациентов с низкой вирусной нагрузкой, поскольку ее сложно обнаружить.

    Как часто проводится лабораторное исследование?

    Первично полимеразная цепная реакция проводится людям, у которых при иммуноферментном анализе были выявлены антитела к возбудителю гепатита. В данном случае она назначается для подтверждения факта заражения человека и установления стадии болезни. Кроме того, анализ позволяет определить субтип вируса, что особенно важно для выбора лекарственных средств.

    Следующим периодом для обязательного лабораторного исследования является 3 месяца от начала противовирусной терапии. Диагностика дает возможность оценить эффективность медикаментов, откорректировать дозу или заменить их.

    Помимо основных анализов, ПЦР может дополнительно проводиться на 4 и 24 неделях от начала лечения. Положительный прогноз болезни подтверждается уменьшением вирусной нагрузки по истечении трех месяцев терапии. Так, например, она должна снизиться с 1 миллиона МЕ/мл до нескольких сотен тысяч.

    Если концентрация патогенных агентов в крови остается на прежнем уровне или несколько нарастает, это указывает на неэффективность противовирусных средств и требует их замены. С помощью ПЦР в конце лечения удается подтвердить выздоровление пациента.

    

    Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, требуется консультация гепатолога или инфекциониста. Учитывая большую частоту ложных ответов при ИФА, анализ используют исключительно для первичного скрининга. Для более тщательного обследования пациента применяется полимеразная цепная реакция.

    Думаете, что вылечить гепатит C невозможно?

    Сегодня современные препараты нового поколения Софосбувир и Даклатасвир с% вероятностью навсегда излечат вас от гепатита C. Новейшие лекарства можно приобрести в России у официального представителя индийского фармгиганта Zydus Heptiza. Заказанные препараты доставят курьером в течение 4 дней, оплата после получения. Получить бесплатную консультацию по применению современных препаратов, а также узнать о способах приобретения вы можете на официальном сайте поставщика Zydus в России.

    Источник: http://propechenku.ru/gepatit/c/kachestvennyj-analiz.html

    Что такое РНК вируса гепатита С?

    Исследование РНК вируса гепатита С является наиважнейшей процедурой, которая позволяет с большой точностью устанавливать длительность и методы лечения больных. Диагностика заболевания состоит из нескольких различных исследований крови, таких как:

    • маркеры гепатита С (анти-HCV);
    • определение РНК вируса гепатита С (РНК HCV).

    Первое исследование делается при первом подозрении на гепатит. Второй вариант является наиболее значимым при лечении HCV РНК, поэтому рассмотрим его более подробно.

    Что такое вирусный гепатит С?

    Вирусный гепатит C, или HCV, это инфекционная болезнь, поражающая печень. Заражение вирусом происходит через кровь. Заразиться можно, делая переливание крови, когда не соблюдаются правила по стерилизации медицинских инструментов. Реже встречаются случаи, когда заболевание получается половым путем или от беременной матери к плоду. Гепатит С бывает 2-х типов.

    

    Хронический гепатит С наиболее опасен. Это форма болезни, которая может длиться на протяжении всей жизни. Она приводит к серьезным проблемам функционирования печени, таким как цирроз либо рак. У 70-90% инфицированных людей болезнь переходит в хроническую стадию.

    Важнейшая опасность гепатита С состоит в том, что он протекает скрытно, без желтушных признаков. При этом чаще всего жалуются на поднятие температуры, тошноту и рвоту, физическую слабость, повышенную утомляемость, потерю аппетита и веса. При этом на фоне небольшого уплотнения тканей печени достаточно часто происходит ее злокачественное перерождение. По этой причине вирусный гепатит С зачастую называют «бомбой замедленного действия» или «ласковым убийцей».

    Другая особенность болезни заключается в очень медленном ее развитии, исчисляемом десятками лет.

    Как правило, заразившиеся не ощущают никаких симптомов и не подозревают о своем истинном состоянии. Часто заболевание можно выявить только при обращении к врачу по другому вопросу.

    К группе риска относятся:

    
    • дети, получившие вирус гепатита С от матерей;
    • наркоманы;
    • люди, прокалывавшие части тела или сделавшие татуировки нестерильными инструментами;
    • получившие донорскую кровь либо органы (до 1992 года, когда гемодиализ не проводился);
    • лица, инфицированные ВИЧ;
    • медицинские работники, контактирующие с инфицированными пациентами.

    Определение РНК гепатита С

    Определение РНК вируса гепатита С, также именуемый ПЦР гепатита С, это исследование биологического материала (крови), с помощью которого можно определить в организме непосредственное наличие самого геноматериала вируса гепатита (любой отдельно взятый вирус является одной-единственной частичкой РНК).

    Основной метод проведения теста — ПЦР, или метод полимеразно-цепной реакции.

    Существуют два вида тестов крови на определение РНК HCV:

    Качественный тест

    Проведение качественного анализа дает возможность определить, находится ли вирус в составе крови. Все пациенты, у которых найдены антитела С-гепатита, должны пройти данный тест. По его результатам можно получить 2 ответа: «присутствует» либо «отсутствует» вирус. По положительному результату теста (обнаружено) можно судить об активном размножении вируса, который заражает здоровые клетки в печени.

    Тест, проводимый на качественный ПЦР, настроен на конкретную чувствительность, от 10 до 500 МЕ/мл. Если обнаруженный в составе крови вирус гепатита при удельном содержании меньше 10 МЕ/мл, то обнаружение вируса может стать невозможным. Очень низкое значение удельного содержания вируса наблюдается среди пациентов, для которых назначена противовирусная терапия. Поэтому важным является тот факт, насколько высока чувствительность медицинской системы для диагностирования и постановки качественного результата при полимеразной цепной реакции.

    

    Зачастую полимеразная цепная реакция C-гепатита проводится сразу же после нахождения соответствующих антител. Последующие тесты, при прохождении противовирусной терапии, проводятся на 4-ю, 12-ю и 24-ю недели. И еще один анализ после прекращения ПВТ делается через 24 недели. Затем — один раз в год.

    Количественный тест

    Количественный анализ ПЦР РНК, иногда называемый вирусной нагрузкой, определяет концентрацию (удельное содержание) вируса в составе крови. Другими словами, под вирусной нагрузкой понимается определенное количество вирусной РНК, которое может находиться в конкретном количестве крови (принято использовать 1 мл, равный 1 см в кубе). Единицы измерения для результатов теста — международные (стандартные) единицы, разделенные на один миллилитр (МЕ/мл). Содержание вируса иногда представляется по-разному, это зависит от лабораторий, где проводятся исследования. Для гепатита С количественное определение иногда использует такие значения, как копии/мл.

    Необходимо понимать, что нет никакой конкретной зависимости в степени тяжести C-гепатита от концентрации данного штамма в составе крови.

    Проверка «вирусной нагруженности» позволяет определить степень инфекционности заболевания. Так риск заразить вирусом другого человека повышается при повышении концентрации гепатита в составе крови. К тому же высокое содержание вируса снижает эффект от проводимого лечения. Поэтому малая вирусная нагрузка является очень благоприятным фактором для успешного лечения.

    К тому же тест гепатита С и его определение методом ПЦР играют большую роль при применении терапии от болезни и определения успешности лечения. На основании результатов теста осуществляется планирование курса реабилитации. Например, при слишком медлительном уменьшении удельной концентрации вируса гепатита, противовирусная терапия продлевается, и наоборот.

    

    В современной медицине считается, что нагрузка большеME/мл является высокой. Нагрузка же сверхME/мл считается критической. Но у специалистов из разных стран и по сей день не появилось одинакового мнения о пределах вирусной нагрузки.

    Частота проведения количественного теста

    В общих случаях количественный анализ на гепатит делается перед проведением противовирусной терапии и через 3 месяца по окончании лечебных процедур для определения качества проведенной терапии.

    В качестве результата для количественного теста станет считаться количественная оценка результатов по образцу, указанному выше. В результате будет вынесен вердикт «ниже измеряемого диапазона» или «в крови не обнаружено».

    Параметр чувствительности качественного теста обычно ниже, чем чувствительность количественного анализа. Расшифровка «Отсутствующий» показывает, что оба вида анализов не нашли РНК вируса. При показателе теста «ниже измеренного диапазона» анализ количественного типа, скорее всего, не нашел РНК гепатита, хотя это подтверждает наличие вируса с очень маленьким удельным содержанием.

    Гепатит C и его генотипы

    Генотипирование РНК вируса гепатита C диагностирует присутствие разных генетических типов гепатита С. Науке известно более 10 типов генома вируса, но для медицинской практики достаточно выделить несколько генотипов, имеющих наибольший удельный вес в регионе. Определение генетического типа играет ключевую роль при выборе сроков лечения, что очень необходимо, если принять во внимание обширный спектр побочных эффектов лекарств от гепатита.

    Способы лечения вирусного гепатита С

    Единственным действенным способом вылечить вирус гепатита, как правило, оказывается сочетание 2-х медпрепаратов: интерферона-альфа совместно с рибавирином. По отдельности эти лекарства не так эффективны. Рекомендуемые дозировки лекарств и сроки применения должны назначаться только врачом и индивидуально каждому пациенту. Лечение этими лекарствами может растянуться на срок от 6 до 12 месяцев.

    Сегодня не изобретено препаратов, гарантирующих стопроцентное выздоровление от вируса. Однако при верно подобранном лечении исцеление пациентов может достигать до 90% от числа заболевших.

    Источник: http://ogepatite.ru/c/rnk-virusa-gepatita-c.html

    Разновидности и необходимость применения исследований методом ПЦР

    Вирус гепатита С — это вирус, который содержит молекулу РНК. Он способен избегать иммунного ответа организма благодаря высоким способностям к мутации. Различают шесть основных генотипов вируса и множество субтипов. В нашем регионе в основном распространены 1, 2 и 3 генотипы.

    У 75–80 % болезнь переходит в хроническую форму, что вызывает фиброз печени — состояние, при котором ткани печени заменяются соединительной тканью. Фиброз, в свою очередь, приводит к раку или циррозу. Основной путь передачи заболевания — через кровь. Если у человека имеются показания к проведению теста на гепатит С, ему проводят два основных теста. Определяют антитела к вирусу, и при их отсутствии считается, что гепатита у него нет. Если же в крови обнаруживается наличие антител к вирусу гепатита, проводится анализ методом ПЦР.

    РНК таким методом определяется в крови уже через 10–12 дней после инфицирования и свидетельствует о том, что вирус активно размножается в организме. В этот период обнаружить вирус другим способом просто невозможно, так как специфических антител он еще не вырабатывает и поражения печени еще незаметны при биохимических анализах и биопсии.

    Разновидности исследований методом ПЦР

    Анализ методом полимеразной цепной реакции имеет определенные преимущества:

    1. При таком исследовании проводится определение самого вируса, а не продуктов его жизнедеятельности. При этом существует возможность определить вид возбудителя.
    2. Методика обладает высокой специфичностью благодаря тому, что исследуется только определенный участок ДНК, уменьшается вероятность получения ошибочных результатов.
    3. Имеет очень высокую чувствительность, определяется даже минимальное количество вируса в крови.

    Существует два основных метода исследования крови на гепатит С при помощи ПЦР: качественный и количественный анализ ПЦР. Качественный метод используется для определения факта наличия вируса. Всем у кого в крови были обнаружены антитела к гепатиту, проводится такой анализ. Результат может быть только двух типов: «обнаружено» и «не обнаружено», последнее значение считается нормой.

    Положительный результат теста означает, что в образце были найдены фрагменты РНК вируса, что, в свою очередь, говорит о том, что человек был инфицирован гепатитом. В случае негативного результата возможны два варианта: инфицирования не было или его концентрация настолько мала, что не обнаруживается данной методикой.

    Количественный метод отличается по сути исследования, по его задачам и по показаниям. Не все больные гепатитом проходят такой анализ. У него, как и у любого другого, существуют определенные цели. Определение вирусной нагрузки или количественный анализ ПЦР на РНК вируса используется:

    • для определения РНК вируса в крови и постановки диагноза «вирусный гепатит»;
    • для прогнозирования хронизации гепатита и течения болезни;
    • для мониторинга противовирусного лечения и принятия решения о его продлении, сокращении или об изменении тактики лечения.

    Исследование проводится при наличии таких показаний:

    • гепатит С обнаружен при качественном исследовании и в крови обнаружены антитела;
    • при микст-гепатитах;
    • если планируется проведение противовирусной терапии;
    • во время и после лечения от гепатита С;
    • при наличии хронического и острого гепатита С.

    Тест проводится для оценки количества единиц вируса в заданном объеме образца крови 1 см³ или 1 мл. Результаты приводятся в цифрах. Показатели используются: МЕ/мл, что означает международная единица на миллилитр и копии на мл, количество копий РНК в 1 мл образца. Чем выше количественный показатель анализа, тем большая вероятность передачи вируса другому человеку.

    Р-ДНК — метод разветвленной ДНК. Более простой и недорогой метод. Используется для большего количества образцов, имеет невысокую чувствительность, от 500 МЕ/мл. При такой чувствительности есть вероятность не определить вирус, даже если он присутствует в крови.

    ТМА — метод транскрипционной амплификации. Такая методика обнаруживает в крови нуклеиновые кислоты. Имеет невысокую стоимость и при этом высокую чувствительность, от 5–10 МЕ/мл. Относительно новая методика, позволяющая ускорить и удешевить процесс тестирования.

    Результаты количественного анализа определение РНК вируса, представленные лабораторией, расшифровываются следующим образом:

    Источник: http://apechen.ru/diagnostika/virus-gepatita-s-kolichestvennyj-analiz.html

    Маркеры гепатита С и расшифровка результатов количественного анализа HCV RNA

    В последнее время в поисковиках интернет-ресурсов все чаще появляется запрос «количественный анализ на гепатит с расшифровкой».

    Действительно, вирус гепатита распространен и опасен, заболевание поражает печень. Название его произошло от лат. hepatitis — воспаление печени. Заражение происходит через кровь либо половым путем, чаще болеют взрослые люди в возрасте от 25 до 50 лет.

    Выделяют несколько типов этого заболевания. Гепатит С не имеет яркой выраженности, но в 40–70% случаев переходит в хроническую форму, способен вызвать цирроз печени и рак. Это заболевание требует точного диагностирования и расшифровки полученных данных, для чего разработаны методики. Одна из них — РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР.

    РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР

    РНК (рибонуклеиновая кислота) — вид макромолекулы, одна из составляющих живой клетки. РНК отвечает за кодировку генетической информации. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет обыкновение мутировать. Известны 6 его подтипов, а также много субтипов.

    Болезнь в своей хронической стадии приводит к фиброзу печени — разрастаются соединительные ткани, структура органа постепенно нарушается. Фиброз поддается своевременному лечению, так как печень не подверглась еще разрушительным процессам. В отличие от цирроза, тяжелого необратимого заболевания печени, в который может перерасти фиброз без принятия необходимых мер вовремя.

    Человеку с подозрением на наличие у него вируса гепатита, определяют антитела к нему. Если их нет — заболевание исключается, при их наличии прибегают к методу ПЦР (полимеразной цепной реакции). В молекулярной биологии он является экспериментальным, но занимает ведущее место среди методик диагностирования инфекционных болезней. С помощью него можно значительно увеличить концентрацию фрагментов молекул в пробе. Через 10 дней после инфицирования РНК уже возможно определить в крови.

    Этот метод является единственным, позволяющим выявить заболевание на ранних стадиях. Другими способами (напр., биохимическим исследованием крови) это сделать невозможно, так как печень еще не поражена.

    Открыл метод в 1993 году биохимик Кэрри Муллис, за что получил Нобелевскую премию. ПЦР стал прорывом в медицине и науке, так как позволил быстро и точно определять инфекции в крови и других биологических материалах человека. Иными словами, метод ускорил развитие диагностики инфекционных заболеваний.

    РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР является эффективным по следующим причинам:

    • имеет хорошую чувствительность — определяется даже малое количество вируса в крови;
    • определяется сам вирус, а не побочные продукты, создаваемые им;
    • определяется вид возбудителя.

    Отличия количественного анализ HCV RNA от качественного

    Метод ПЦР включает два основных способа исследования биологического материала на поиск вируса гепатита С:

    Эти исследования имеют различные задачи.

    Качественный анализ на гепатит с расшифровкой подтверждает наличие вируса после того как в крови уже найдены антитела к этому заболеванию. Если исследование дало положительный результат, значит, болезнь обнаружена. Иными словами, человек инфицирован. Если получен отрицательный результат, это означает, что человек не инфицирован, либо в наличии слишком маленькая концентрация вируса. Эта концентрация не обнаруживается таким способом.

    Помимо этого клиническая картина заболевания строится на основании маркеров гепатита С и расшифровки анализа. Основные маркеры — иммуноглобулины (антитела) M и G. Наличие их в крови пациента указывает на нехарактерный процесс для здорового организма. На основании наличия этих антител больному, как правило, устанавливается первичный диагноз.

    Количественный анализ назначается при первичном обнаружении антител и при необходимости проведения лечения.

    Также количественный анализ на гепатит С назначают при выявлении микст-гепатитов (заражение сразу несколькими вирусами).

    Количественный анализ с расшифровкой проводится с целью:

    • прояснения окончательного диагноза;
    • выстраивания прогнозов относительно течения заболевания и его лечения — продление, сокращение лечения либо изменение тактики;
    • мониторинга терапии.

    Чтобы результаты были верными, нужно соблюдать установленный режим перед тем как сдавать кровь:

    • прийти в лабораторию натощак, последний раз принять пищу можно за 8 часов до процедуры;
    • за два дня до исследования запрещен алкоголь, жирные и жареные продукты;
    • ультразвуковые исследования, массаж, физиотерапию перед исследованием проводить нельзя;
    • за день запрещен прием лекарств, если прием отдельных препаратов невозможно отменить, об этом сообщается до забора крови;
    • перед процедурой рекомендуется снизить по возможности физические и нервные нагрузки.

    Выполнение этих требований будет залогом получения верных результатов количественного анализа на гепатит С.

    Расшифровка количественного анализа

    После получения показателей количественного анализа необходимо сделать расшифровку результатов анализов на гепатит С. Результаты вычисляются и в единицах МЕ/мл, и в копиях на мл. Для получения результатов, пересчитанных в копии, применяют несколько методик.

    • HCV Monitor (коэффициент пересчета на МЕ — 2,7);
    • LCX HCV RNA (коэффициент пересчета на МЕ — 3,8).

    Таблица. Расшифровка количественного анализа HCV RNA методом ПЦР.

    Источник: http://pechenka.online/gepatit/c/analiz-hcv-rna.html

    Rna hcv гепатит с кач что это

    Приветствуем вас на сайте интернет-аптеки IMMCO.ru

    Вы или кто-либо из вашего окружения больны гепатитом С? Не стоит отчаиваться. Сегодня гепатит С полностью излечим, терапия занимает не так много времени, удобна в применении, доступна по цене и не вызывает сильных побочных эффектов.

    Что нужно сделать, чтобы избавиться от гепатита С:

    1. Сдайте анализ ПЦР (не ИФА!). Если бюджет позволяет, лучше сдать количественный анализ. Если нет – качественный;

    2. С результатами – к нам. Согласно нашей политике о конфиденциальных данных, ваши персональные данные в полной безопасности. Обязательно сообщите о сопутствующих заболеваниях и принимаемых препаратах. Чтобы связаться с нами для подбора схемы лечения и заказа препаратов:

    -Позвоните по телефону-93-12, звонок бесплатный по всей РФ или -Напишите нам на адрес электронной почты или -Задайте вопрос специалисту в онлайн (чат расположен в правом нижнем углу сайта);

    3. После консультации с нашими специалистами закажите доставку необходимого препарата.

    4. Дождитесь курьера и приступайте к лечению в день заказа. Соблюдайте инструкцию. В случае, если у вас есть какие-либо сомнения, свяжитесь с нашими специалистами;

    5. Пройдите терапию и избавьтесь от вируса навсегда.

    Наша интернет-аптека предлагает вам эффективный курс лечения от гепатита С. Эффективность излечения любого генотипа вируса составляет 98%-100%. Эти цифры – официальные данные клинических исследований, подтвержденные современной медицинской практикой. Мы предлагаем вам терапию современными противовирусными препаратами на основе софосбувира.

    Для ознакомления с этим революционным действующим веществом, вы можете посмотреть фрагмент передачи с Еленой Малышевой. Увы, она умолчала о ценах на эти препараты в Европе и Америке, которые не по карману 99% населения и этих стран и нашей. Однако и в этом случае выход есть. Наша компания-экспортер индийских аналогов противовирусных препаратов доставляет их в Россию и страны бывшего СНГ по ценам производителя, предназначенным для внутреннего рынка Индии (в сотни раз ниже цен на американском и европейских рынках). Все препараты изготовлены индийскими фармкомпаниями по лицензии и имеют одобрение Всемирной Организации Здравоохранения.

    Вирус гепатита С, определение РНК (количественное) (HCV-RNA)

    Описание

    Аналитические показатели. Выявление РНК вируса гепатита С (hepatitis С virus) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и определение вирусной нагрузки в сыворотке крови:

    • определяемый фрагмент — консервативный участок генома вируса гепатита_С;
    • диапазон достоверности теста теперь составляет 43 – 6,90 Е7 МЕ/мл;
    • анализируются генотипы 1- 6 (1, 2, 3, 4, 5, 6);
    • чувствительность теста составляет от 15 МЕ/мл;
    • специфичность теста составляет 99,6%.

    Количественная характеристика содержания РНК HСV в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии.

    Подготовка

    Исследование желательно проводить натощак. Между последним приёмом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 часов.

    Показания

    • Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
    • Определение тактики лечения пациентов.
    • Точная оценка эффективности лечения.

    Интерпретация результатов

    Внимание! Если тест выполняется на оборудовании компании Хоффман-ля-РОШ по жёстко стандартизованной технологии PCR в реальном времени, то результат, в отличие от его российских аналогов, выдаётся в принятых международных единицах (МЕ).

    Единицы измерения: МЕ/мл количество выявленной РНК вируса гепатита C.

    Форма выдачи результатов для тестов на оборудовании компании Хоффман-ля-РОШ по жёстко стандартизованной технологии PCR в реальном времени

    Источник: http://gepatit-c.ru/analizy/hcv_rna_quant.html